> ဘလော့ > စက်မှုသတင်း

အဘယ်ကြောင့်ဆိုသော် ဆဲလ်ယဉ်ကျေးမှုသည် သွေးနီဥများကို ပထမဦးစွာ lyse စေသနည်း။

2022-12-23

အခြေခံမိတ်ဆက်
Erythrocyte lysate သည် သွေးနီဥဆဲလ်များကို ဖယ်ရှားရန် အရိုးရှင်းဆုံးနှင့် အလွယ်ကူဆုံးနည်းလမ်းများထဲမှ တစ်ခုဖြစ်ပြီး၊ ဆိုလိုသည်မှာ နူကလိဒ်ဆဲလ်များကို မပျက်စီးစေဘဲ သွေးနီဥများကို အပြည့်အဝဖယ်ရှားပေးနိုင်သည့် lysate နှင့် သွေးနီဥများကို ခွဲထုတ်ရန်ဖြစ်သည်။ Lysate cleavage သည် အပျော့စား သွေးနီဥဆဲလ်များကို ဖယ်ရှားသည့်နည်းလမ်းဖြစ်ပြီး အင်ဇိုင်းအစာခြေခြင်းဖြင့် ပြန့်ကျဲနေသော တစ်သျှူးဆဲလ်များကို ခွဲထုတ်ခြင်းနှင့် သန့်စင်ခြင်း၊ lymphocytes ခွဲခြားခြင်းနှင့် သန့်စင်ခြင်းနှင့် တစ်ရှူးပရိုတင်းနှင့် nucleic စမ်းသပ်မှုများတွင် သွေးနီဥများကို ဖယ်ရှားခြင်းတို့အတွက် အဓိကအသုံးပြုသည်။ အက်ဆစ်ထုတ်ယူခြင်း။ သွေးနီဥဆဲလ်များ၏ lysate မှရရှိသော တစ်ရှူးဆဲလ်များတွင် သွေးနီဥများမပါဝင်သည့်အပြင် မူလယဉ်ကျေးမှု၊ ဆဲလ်ပေါင်းစပ်မှု၊ စီးဆင်းမှု cytometry၊ နျူကလိကလစ်အက်ဆစ်နှင့် ပရိုတင်းဓာတ်များကို ခွဲထုတ်ခြင်းနှင့် ထုတ်ယူခြင်းစသည်ဖြင့် ထပ်မံအသုံးပြုနိုင်ပါသည်။

အသုံးပြုရန်လမ်းညွှန်ချက်များ
တစ်ရှူးဆဲလ်နမူနာ
1. လတ်ဆတ်သောတစ်ရှူးများကို ပန်ကရိယ/အင်ဇိုင်း သို့မဟုတ် collagenase ဖြင့် ချေဖျက်ပြီး ဆဲလ်တစ်ခုတည်းအဖြစ်သို့ ပျံ့နှံ့သွားပြီး supernatant ကို centrifugation ဖြင့် စွန့်ပစ်ခဲ့သည်။

2. ရေခဲသေတ္တာထဲမှ ELS lysate ကို 4â¢ lysate ယူပြီး၊ ELS lysate ကို 1:3-5 အချိုးဖြင့် cell precipitate သို့ထည့် (ဆဲလ်ကျုံ့ထားသော 3-5ml သို့ lysate 1ml ကိုထည့်ပါ) ညင်သာစွာနှပ်ပြီး ရောမွှေပါ။

3. 800-1000rpm တွင် centrifuge ကို 5-8 မိနစ်ကြာထားပြီး အပေါ်ပိုင်းအနီရောင်အကြည်အရည်ကို လွှင့်ပစ်ပါ။

4. မိုးရွာသောအပိုင်းကို Hank ၏ဖြေရှင်းချက် သို့မဟုတ် သွေးရည်ကြည်မပါသော ယဉ်ကျေးမှုဖြေရှင်းချက်ဖြင့် 2-3 ကြိမ် စုဆောင်းပြီး ဗဟိုပြုထားသည်။

5၊ ကွဲအက်ခြင်း မပြီးမြောက်ပါက အဆင့် 2 နှင့် 3 ကို ထပ်ခါတလဲလဲ လုပ်နိုင်ပါသည်။

6. နောက်ဆက်တွဲစမ်းသပ်မှုများအတွက် ပြန်လည်ရှင်သန်ခြင်းဆဲလ်များ၊ RNA ကို ထုတ်ယူပါက၊ DEPC ရေကို အသုံးပြု၍ အဆင့် 4 မှ ပြင်ဆင်ထားသော ဖြေရှင်းချက်တွင် ထိုသို့ပြုလုပ်ခြင်းသည် အကောင်းဆုံးဖြစ်သည်။

သွေးနီဥများသည် ရက်ပေါင်း 120 သာ သက်တမ်း တိုတောင်းသော်လည်း ၎င်းတို့သည် သွေးများ အလွန်လျင်မြန်စွာ မျိုးပွားနိုင်ကာ အထူးသဖြင့် ဆဲလ်ခွဲထွက်နိုင်စွမ်းရှိပြီး ၎င်းတို့အားလုံး၏ အလျင်မြန်ဆုံး ခွဲထွက်သည့်ဆဲလ်များ ဖြစ်သောကြောင့် ဤဆဲလ်သည် အလွန်တန်ဖိုးရှိပါသည်။ ဒါကြောင့် ဆဲလ်ယဉ်ကျေးမှုအတွက် အလွန်အသုံးဝင်ပါတယ်။ အလွန်ရိုးရှင်းသည်၊ ၎င်းတွင် မည်သည့် organelles မျှမရှိပါ၊ ဆဲလ်အမြှေးပါးများနှင့် ပရိုတင်းများသာဖြစ်သည်။

အရင်:ELISA kit ရဲ့ လုပ်ဆောင်ချက်တွေက ဘာတွေလဲ။

နောက်တစ်ခု:Reagent လိုအပ်ချက်များနှင့် ဖြေရှင်းချက်အာရုံစူးစိုက်မှု၏ အခြေခံကိုယ်စားပြုမှု။